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          梯度PCR儀的溫度控制指標包括哪三個方面?
          點擊次數:77 發布時間:2018-12-20
          PCR,中文譯為聚合酶鏈式反應,其實是一種DNA的快速擴增技術,其擴增效率之高就象核裂變的“鏈式反應”那樣。PCR技術通過兩個短的稱為引物的DNA小片段和一種耐熱的酶的作用。
           
          梯度PCR儀把一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度),通常有12種溫度梯度,這樣的儀器就叫梯度PCR儀。因為被擴增的不同DNA片段,其最適退火溫度是不同的,通過設置一系列的梯度退火溫度進行擴增,從而一次性PCR擴增,就可以篩選出表達量高的最適退火溫度,進行有效的擴增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴增,這樣節約成本的同時也節約了時間。主要用于科研,教學機構。梯度PCR儀,在不設置梯度的情況下也可以做普通PCR擴增。具有雙槽梯度的不多,領成具備此功能。
           
          梯度PCR儀溫度控制指標包括哪三個方面?
           
          1、溫度的準確性:是指樣品孔溫度與設定溫度的一致性,它直接關系到實驗的成敗。由于PCR是一個幾何級數擴增的過程,不論是變性、退火還是延伸都需要準確控制溫度,對退火溫度而言溫控顯的尤為重要,有時1°甚至0.5°的差異也能決定實驗的成功與失敗,所謂差之毫厘,謬之千里。因而對PCR擴增儀而言溫度控制就意味著質量。
           
          2、溫度的均一性:是指樣品孔間的溫度差異,它關系到在不同樣品孔進行反應結果的一致性。有用戶發現用同樣的樣品,同樣的PCR反應程序,最后的結果竟然差異非常明顯,或許就是因為不同位置的溫度不均勻所致。同時位置邊緣效應對PCR實驗可重復性影響非常明顯。
           
          3、升降溫速率:更快的升降溫速度,可以縮短反應進行的時間,而且縮短了可能的非特異性結合、反應的時間,能提高PCR反應的特異性。
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